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pH标准液如何正确使用及其主要作用（二）

pH标准液的主要作用是什么？  1、pH测量前标定校准pH计   2、用以检定pH计的准确性，将pH电极插入pH9.18溶液中，检查仪器显示值和标准溶液的pHs值是否一致；   3、在一般精度测量时检查pH计是否需要重新标定。pH计标定并使用后也许会产生漂移或变化，因此在测试前将电极插入与被测溶液比较接近的标准缓冲液中，根据误差大小确定是否需要重新标定。   4、检测pH电极的性能。 在生物化学研究中,为什么要使用缓冲液?在使用缓冲液时应注意那些问题?四川PBS缓冲液进货价

PH计校正的标准缓冲液有几种？

ph计校正常用的三种标准溶液：pH分别为4.0、7.0和10.0一般4.0的可以用邻苯二甲酸氢钾体系配制，7.0的用磷酸二氢钾-磷酸氢二钠体系配制，10.0的用碳酸钠-碳酸氢钠体系配制，可以根据需要的缓冲容量确定浓度。校正pH计所用工具和原料：标准缓冲液（应选择与供试液pH值接近的标准缓冲液），目前标准溶液有7种，在我国一般使用以下3种溶液：(pH值在25℃时)1)邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)pH4.003；0.05M2)混合磷酸盐(Na2HPO4)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠混合盐溶液pH6.864；0.025M3)硼砂(Na2B4O7·l0H2O)pH9.182；0.01M 四川PBS缓冲液进货价为了避免PBS缓冲液对人体的负面影响,建议使用时遵循正确的使用方法和容器规格,避免长时间或过量使用。

    1:50～l:800)后，按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照)，保温，洗涤。加工作浓度酶标抗体，洗涤，加底物显色，加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值；为0．8左右，阴性参考血清A值<0．1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg／L、lmg／L、／L三个浓度按行包被，每一个浓度包被三行(每行3孔)，分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原，弱阳性抗原和阴性对照，将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度，分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色，加酸终止反应，分别读取A值。以强阳性抗原液A值在，阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1．1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择：①用IgG进行包被，洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中，保温、洗涤。③加酸终止反应后，读取吸光度(A)。读取A值在1．0时的酶标抗体稀释度，作为酶标抗体的工作浓度。

生化实验中加入缓冲液的目的和作用生物缓冲液是一种能够保持pH值不受酸碱度影响的溶液，多种细胞只能在很小的PH范围内活动，需要有缓冲体系来维持整个过程不受干扰。尤其是在生化实验中，生物缓冲液极其受重视，因为实验中的各类物质非常容易使PH发生变化，而这就直接影响到整体工作进程。例如在酶活性实验中，有时因为PH的变化大，会使酶活性下降甚至失活，导致实验无法进行下去，所以在生化实验中加入缓冲液的主要目的就是维持PH的稳定。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。

    常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。常见的缓冲体系有：1、弱酸和它的盐（如HAc---NaAc）2、弱碱和它的盐（NH3·H2O---NH4Cl）3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐（如NaH2PO4---Na2HPO4）的水溶液组成。而生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在。三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是，4℃时是，37℃时是，因此，4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。在，其缓冲能力极为不理想。 通过选择合适的缓冲液可以确保酶在条件下进行催化反应。四川PBS缓冲液进货价

生物缓冲液是一种能够保持pH值不受酸碱度影响的溶液。四川PBS缓冲液进货价

pbs缓冲液的配制配方是10X的PBS母液，然后再对其母液进行1:10稀释即可获得PBS缓冲液。PBS是磷酸盐缓冲液（PhosphateBufferSaline），是生物学实验室**常用的缓冲液之一。其主要成分包括：氯化钠（NaCl）、氯化钾（KCl）、磷酸氢二钠（Na2HPO4）和磷酸二氢钾（KH2PO4）。配制步骤：清洗干净所需烧杯、转子和量筒，向一个烧杯装少量去离子水（约100ml）并放入一个转子后放在称量天平旁备用；向另一个烧杯装约800ml去离子水并在微波炉或者水浴锅（65°以上均可）中加热。注意：由于实验室所购买的Na2HPO4常常带有二水、七水或者十二水，与之对应的重量分别为1.78g、2.68g、3.58g。向烧杯中加入预热的去离子水，烧杯放置在磁力搅拌器上搅拌溶解。用量筒定容到1L，保存备用。取100ml10X的PBS母液，加入900ml去离子水即可获得pH=7.4的PBS缓冲液（无需用pH计校准PH值）。四川PBS缓冲液进货价