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胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含0.25%胰酶（Trypsin）、0.02%EDTA和酚红,不含Ca2＋和Mg2＋。该消化液已用0.22μm滤膜过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点,通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。使用说明：贴壁细胞的消化：1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。2、加入少量胰酶细胞消化液（含酚红）,略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化,或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来；此时吸除胰酶细胞消化液；加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。4、如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。5、如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。胰酶细胞消化液和胰蛋白酶消化液是一样的吗？湖南EDTA胰酶供应商家

胰酶的作用原理是什么呢？胰酶是一种蛋白酶，酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基端肽链，通过在特定位置上降解蛋白，使细胞膜上和培养皿结合处蛋白降解，从而使两者分离。这时细胞在自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力的作用下成为球形。使用胰酶时需注意哪些细节问题？在使用胰酶（Trypsins）细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差，做流式时的CDMarker也可能会下降。胰酶进行分装时尽量分装成多瓶，并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时液体体积会膨胀，多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并可能造成污染。胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞，如胚胎、上皮、肝、肾等组织，但对于纤维性组织和较硬的*组织效果较差。胰酶消化效果主要与pH值、温度、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关。湖南EDTA胰酶供应商家细胞消化时，如果消化液中只有胰酶，不含EDTA，不去除是没有问题的。

    胰蛋白酶用法用量1.每次～5mg，用蒸馏水5～10ml溶解。2.一般应用：1次5000单位，每日1次肌注，用量酌情而定。为防止疼痛，可加适量普鲁卡因。局部用*视情而定，可配成溶液制剂（～，微碱性时活性**强）、喷雾剂、粉剂、油膏等，用作体腔内注射、患部注射、喷雾、湿敷、涂搽等。3.治蛇毒：取注射用结晶胰蛋白酶2000单位1～3支，加～（或注射用水）4～20ml稀释，以牙痕为中心，在伤口周围作浸润注射，或在肿胀部位上方作环状封闭1～2次。如病情需要可重复使用。若伤肢肿胀明显，可于注射本品30分钟后，切开伤口排毒减压（严重出血者例外），也可在肿胀部位针刺排毒。如伤口已坏死、溃烂，可用其***胰蛋白酶注意事项1.不可作静注。用前需作划痕试验，应注意可能产生过敏反应。2.吸取注射液后应另换针头，以免注射时疼痛。3.外用时，可采用注射用制剂以缓冲液溶解，但必须在3小时内用毕。胰蛋白酶不良反应：1．注射局部疼痛、硬结。2．本品可引起组胺释放，产生全身反应，有寒战、发热、***、头晕、胸痛、***、皮疹、血管神经性水肿、呼吸困难、眼压升高、白细胞减少等。症状轻时不影响继续***，给予抗组胺*和对症*物即可控制，严重时应即停*。3．本品偶可致过敏性休克。

    胰酶使用注意：1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。胰酶配制方法：1、培养液配制，方便好用，对细胞影响小，并且培养液的ph值正好适合胰蛋白酶的溶解2、生理盐水配制，要先调ph值（①胰酶（1：250）②③④⑤⑥⑦Water1000mL磁力搅拌2-3小时，调，过滤除菌。）3、pbs（：称取胰酶粉末，先用少许灭菌过的PBS调成糊状，然后补足到100ml。置室温搅拌4小时或冰箱内过夜，过滤灭菌，分装，4℃保存备用。）;或是hanks或是D-hanks液配制（1.称取胰蛋白酶粉末置烧杯中，先用少许D-Hanks平衡盐溶液（）调成糊状，然后再补足D-Hanks平衡盐溶液，搅拌混匀，置室温4小时或冰箱过夜，并不断搅拌振荡；2.次日，先用滤纸粗滤，再进行过滤除菌，分装入瓶中，低温冰箱保存备用，常用浓度为。胰蛋白酶溶液偏酸，使用前可调用碳酸氢钠溶液调pH至。）一般，至于作用效果，需要消化一次细胞感觉一下，因为不同厂家的酶不一样，有的作用温和，有的作用剧烈。4、是否需要四度放置过夜，取决于你的胰酶的纯度。过去的胰酶纯度不高，所以难以溶解，需要四度过夜.而现在的胰酶纯度都很高。 胰酶PH值6.8左右时呈淡黄色。

胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37°℃时，胰酶溶液的作用能力**强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如:D-Hanks液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。福建EDTA胰酶一般多少钱

胰酶浓度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作为消化液。湖南EDTA胰酶供应商家

1、细胞培养过程中为什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一种蛋白酶，酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基端肽链，通过在特定位置上降解蛋白，使细胞膜上与培养皿壁结合处蛋白降解，从而使两者分离。这时，细胞由于自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力可成为球形。图1.胰酶酶切位点2、使用胎牛血清培养细胞，在使用胰酶消化时发现血清可以终止此过程，这是什么原因？血清终止的原理其实是竞争抑制，就是用过量的牛血清中含有的蛋白和胰酶结合，使胰酶失去消化细胞蛋白的机会。3、为什么使用了胰蛋白酶消化，细胞还是成团的，这可能是什么原因导致的？①消化时间不够②吹打力度不够③胰酶消化液浓度不够④细胞密度过高之后才消化传代⑤胰酶存储不当，或者使用了过期胰酶湖南EDTA胰酶供应商家