广西重组胰酶价格对比 北京同创正业生物科技供应

    (含)英文名:(含)储存条件:-20℃产品简介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其**适温度约为37℃。胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()由、除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下1min左右就可以消化大多数贴壁细胞。使用说明(*供参考):1.贴壁细胞的消化①吸除培养液,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,去除残余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液(),略盖过细胞即可,室温放置。(不同的细胞消化时间有所不同)③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。④如果发现消化不足,则加入胰蛋白酶-碳酸氢铵溶液()重新消化。⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落。 细胞消化时，胰酶不去除对细胞的影响？广西重组胰酶价格对比

细胞消化胰酶的配制对一般细胞0.25%胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100mlPBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2称胰酶0.25g3加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4调PH7.45仍在冰浴中6过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，酶就变性了。低温，防止酶失活对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2+，增加消化效力广西重组胰酶价格对比胰酶在细胞培养中的作用和在消化酶中的作用？

    胰酶使用注意：1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被**污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化：1、吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清2、加入少量胰酶细胞消化液，略盖过细胞即可，根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟（不同的细胞消化时间有所不同）3、显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状；或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质（如细胞外基质）水解，改变细胞间的连接。

    胰蛋白酶用法用量1.每次～5mg，用蒸馏水5～10ml溶解。2.一般应用：1次5000单位，每日1次肌注，用量酌情而定。为防止疼痛，可加适量普鲁卡因。局部用*视情而定，可配成溶液制剂（～，微碱性时活性**强）、喷雾剂、粉剂、油膏等，用作体腔内注射、患部注射、喷雾、湿敷、涂搽等。3.治蛇毒：取注射用结晶胰蛋白酶2000单位1～3支，加～（或注射用水）4～20ml稀释，以牙痕为中心，在伤口周围作浸润注射，或在肿胀部位上方作环状封闭1～2次。如病情需要可重复使用。若伤肢肿胀明显，可于注射本品30分钟后，切开伤口排毒减压（严重出血者例外），也可在肿胀部位针刺排毒。如伤口已坏死、溃烂，可用其***胰蛋白酶注意事项1.不可作静注。用前需作划痕试验，应注意可能产生过敏反应。2.吸取注射液后应另换针头，以免注射时疼痛。3.外用时，可采用注射用制剂以缓冲液溶解，但必须在3小时内用毕。胰蛋白酶不良反应：1．注射局部疼痛、硬结。2．本品可引起组胺释放，产生全身反应，有寒战、发热、***、头晕、胸痛、***、皮疹、血管神经性水肿、呼吸困难、眼压升高、白细胞减少等。症状轻时不影响继续***，给予抗组胺*和对症*物即可控制，严重时应即停*。3．本品偶可致过敏性休克。消化同种细胞时含EDTA的胰酶消化时间会比不含EDTA时间短。

细胞传代消化时所用胰酶的浓度越高是越好 贴壁细胞的消化：  常用的消化方法主要有酶消化法、离子螯合剂、物理法和冷冻法。其中**常用的是酶消化法。酶消化法：贴壁干细胞酶消化传代时通常采用两种方式：1、加入胰酶等干细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；2、加入胰酶后，镜下观察待干细胞开始脱落时，弃去胰酶，加入培养液并分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对干细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的干细胞先脱落。含EDTA的胰酶消化活力会比不含EDTA的强。天津重组胰酶产品介绍

细胞培养中胰酶的作用一般是分解脂肪等。广西重组胰酶价格对比

    一、EDTA-胰蛋白酶的配制实验简介：EDTA-胰蛋白酶的配制实验所需的EDTA是乙二胺四乙酸，一种金属螯合剂。它通常与胰蛋白酶结合使用。原因是钙和镁等金属离子会降低胰酶的活性，因此在使用胰蛋白酶消化液时应添加EDTA。它可以螯合这些离子并消除胰酶的**作用。二、EDTA-胰蛋白酶的配制实验所需材料及试剂：PBS,氢氧化钠,EDTA,三、EDTA-胰蛋白酶的配制实验步骤：1.磷酸酶的质量/体积比为％，即将。注意，尽量不要用水溶解，因为必须保持渗透压。％％，可根据细胞消化的难度进行调整。不需要EDTA，可以省略易于消化的细胞。EDTA对细胞粘附有影响，因此应大量使用。如果影响粘附，则必须将其用于消化，在用完全培养基终止消化后，离心并弃去上清液，然后添加完全培养基以进行培养以除去EDTA。如果不影响附着力，则不要离心。。用磷酸酶稀释PBS。4.请注意，血清可以阻止血浆酶的作用，但不能阻止EDTA。对于某些细胞，有必要在消化后停止离心。5.当pH约为8时，磷酸酶和EDTA**易溶解。在制备过程中，您可以先滴几滴氢氧化钠以将pH调整为8。请注意，磷酸酶会使溶液变酸，因此您应随时溶解时测量pH值。调整。请注意，不应添加过量的氢氧化钠，否则电池将无法承受碱的作用。广西重组胰酶价格对比