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中国台湾EDTA胰酶联系方式 无锡亿赛生物科技供应

2024-11-14 05:11:40

    收藏查看我的收藏0有用+1已投票0胰蛋白酶编辑锁定本词条由“科普**”百科科学词条编写与应用工作项目审核。胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)为蛋白酶的一种,EC,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。在胰脏是胰蛋白酶的前体胰蛋白酶原被合成后,作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用。是特异性**强的蛋白酶,在决定蛋白质的氨基酸排列中,它成为不可缺少的工具。中文名胰蛋白酶英文名Trypsin别称胰酶化学式C6H15O12P3分子量≈24000CAS登录号9002-07-7EINECS登录号232-650-8[1]熔点115℃[1]水溶性易溶外观白色或类白色目录1生物制品简介?物化性质2*典标准?来源含量?制法要求?性状?鉴别?检查?效价测定?制剂3胰蛋白酶的医学检查?检查名称?分类?胰蛋白酶的测定原理?试剂?操作方法?正常值?化验结果临床意义?附注?相关疾病4生物*品说明?*理作用?适应证?禁忌证?用法用量?注意事项?不良反应:?**点评5其他。胰蛋白酶可以用于原代细胞的传代过程中分散组织。中国台湾EDTA胰酶联系方式

    胰酶使用注意:1、在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被**污染。2、胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。贴壁细胞的消化:1、吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,根据胰酶效率差异可以增加惑减少胰酶用量。室温放置30秒至2分钟(不同的细胞消化时间有所不同)3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状;或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶(Trypsin),EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,改变细胞间的连接。河南胰酶进口细胞消化时,胰酶不去除对细胞的影响?

胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽进而分解为氨基酸,其**适温度约为 37°℃。Trypsin solution(2.5%)由 2.5%胰酶组成,不含 EDTA,经过滤除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下 1min 左右就可以消化下大多数贴壁细胞。该溶液浓度较高,可以稀释到相应浓度后使用。

对一般细胞0.25%胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)配方:100mlPBS,0.25g胰酶步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2称胰酶0.25g3加入PBS中,低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4调PH7.45仍在冰浴中6过滤,分装,-20℃保存,4℃短期内用完tip:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫,酶就变性了。低温,防止酶失活对难消化的细胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2,增加消化效力有些胰酶溶液里含有酚红作为PH值指示剂。

    胰蛋白酶:(Trypsin)为蛋白酶的一种,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。由223个氨基酸残基组成的单链多肽,主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端。按干燥品计算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500单位。作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH为、温度为37℃时,胰酶溶液的作用能力**强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。终止消化时,可用含有血清培养液终止胰酶对细胞的作用。有些细胞容易消化(如鸡胚原代成纤维细胞)可用胰酶进行消化,可以不加EDTA。 实际消化后细胞状态不会有太大差异,注意控制消化时间即可。河南胰酶进口

适用于贴壁细胞的消化传代;也可用于组织细胞分离的初步消化。中国台湾EDTA胰酶联系方式

    胰蛋白酶**点评胰蛋白酶能使痰、血凝块溶化变稀,易于引流排痰,加速创面愈合净化,促进肉芽**增生,而不损伤正常**,临床上有消消肿功能。[4]胰蛋白酶其他胰蛋白酶细胞培养胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的**或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH为、温度为37℃时,胰酶溶液的作用能力**强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶**剂终止胰酶对细胞的作用。1.称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为%,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调PH到左右)或PBS(D-hanks)液中。搅拌混匀,置于4℃内过夜。2.用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(微米微孔滤膜)抽滤**。3.分装成小瓶于-20℃保存以备使用可!词条图册更多图册参考资料1.胰蛋白酶.化学品数据库[引用日期2017-05-26].***典**会,***典2010版[M],北京:**医*科技出版社。中国台湾EDTA胰酶联系方式

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